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凝膠凈化儀包含了凝膠制備和電泳兩個步驟
點擊次數:252 更新時間:2023-05-18
   凝膠凈化是一種常用的蛋白質純化方法,它能夠快速、簡便地將目標蛋白質從復雜混合物中分離出來。而凝膠凈化儀則是具體實現凝膠凈化過程的設備。
 
  一、凝膠凈化原理
  凝膠凈化是依靠分子量篩選效應來進行蛋白質純化的。在凝膠中,由于其空間結構和酸堿度等因素的影響,不同大小的蛋白質會在凝膠孔道中移動速度不同,進而實現分離的效果。
 
  二、凝膠凈化儀主要由電泳槽、電源、恒溫裝置和收集系統等部分組成。其中電泳槽是核心的部件,它包含了凝膠制備和電泳兩個步驟。
  1.凝膠制備
  凝膠制備通常使用聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠。其中,聚丙烯酰胺凝膠是目前應用廣泛的凝膠材料之一。在制備聚丙烯酰胺凝膠時,需要將單體丙烯酰胺、交聯劑N,N'-甲撐二丙烯酰胺和過硫酸銨等混合后進行聚合反應。通過控制單體與交聯劑的比例和加入過硫酸銨的量等因素,可以調節凝膠孔徑和網絡結構,從而實現對不同大小蛋白質的篩選分離。
 
  2.電泳
  凝膠制備好后,就可以進行電泳操作了。在電泳過程中,需要將樣品溶液注入凝膠上方的樣品槽中,并將電極插入兩端,接通電源。此時,電場作用下,帶電粒子(包括帶電的DNA、RNA或蛋白質)會向電極方向移動,根據其大小進行分離。
 
  三、凝膠凈化儀的優點:
 ?。?)具有高效性:能夠快速地將目標蛋白質從復雜混合物中分離出來。
 
 ?。?)靈敏度高:能夠檢測到非常微小的蛋白質量,并進行準確的分離。
 
 ?。?)純度高:能夠將目標蛋白質從復雜混合物中高效地純化出來,并且不會受到其他成分的干擾。
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